更新時間:2024-01-22
IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:SIGLEC5 Others Human 人 SIGLEC5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒 IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1mlFAM172A: FAM172A蛋白抗體 人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1HK-2細(xì)胞,人腎小管近段上皮細(xì)胞 負(fù)鼠腎細(xì)胞,OK細(xì)胞 CL-0389NCI-
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
1、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細(xì)胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 | 1×106 | P-X1134 |
一、商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 |
種屬 | 大鼠 |
細(xì)胞別稱 | IEC6;IEC-6;大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 |
年齡性別 | |
生長特性 | 貼壁生長 |
組織來源 | 小腸 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景簡介 | 可抑制該細(xì)胞的生長。該細(xì)胞表達(dá)腸上皮抗原,在20代以前保持恒定的生長速度和細(xì)胞形態(tài),此后生長速度迅速下降,細(xì)胞形態(tài)也發(fā)生改變。 |
生物安全等級 | |
細(xì)胞規(guī)格 | 1×106 |
支原體檢測 | 無 |
基因表達(dá)情況 | |
保藏機(jī)構(gòu) | 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心 ;atcc |
培養(yǎng)基 | 90%DMEM+10% FBS+PS |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
倍增時間 |
2、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
MHC class I: 組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體 人羊膜上皮細(xì)胞cDNAHAmEpiC cDNA
BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 BALB/3T3 clone A31 mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠細(xì)胞色素P450家族成員11A1(CYP11A1)ELISA試劑盒 IL-17(Human Interleukin 17) 人白介素17 96T
MRPS22: 線粒體核糖體蛋白S22抗體 EM2 Others Human 人 EM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0362HS 683(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒 LBP 大鼠脂多糖結(jié)合蛋白 96T
MPP7: 棕櫚酰化膜蛋白7抗體 雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12
phospho-HNF4 (Ser304): 0酸化肝細(xì)胞核因子4α抗體 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S4 胃腺癌細(xì)胞,SGC7901細(xì)胞 CW-2(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)
REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人彈白(Elastin)ELISA 試劑盒 T7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag標(biāo)簽抗原 0.5mg
HMG14: 高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 0.1ml
Rhesus antibody Rh CCDC60 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白60抗體 CM-M034小鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
TSCCA細(xì)胞,人舌鱗癌細(xì)胞系 乙型副傷門氏菌 黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm 人膽酸(Cholic acid)ELISA 試劑盒 V5 tag(recombinant V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原 0.5mg
IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞P2X5b: 三0酸腺苷受體P2X5b抗體 SW13細(xì)胞,人腎上腺皮質(zhì)瘤 人癌細(xì)胞,BT-549細(xì)胞 抗真菌溶液AMS
HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 (A/osich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠低氧誘導(dǎo)因子2α(HIF2α)ELISA試劑盒 NKB (Ret) 大鼠神經(jīng)肽B 96T
P2RX6: 三0酸腺苷受體P2X6抗體 猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-
RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 P-CK(pan-cytokeratin) 豬廣譜細(xì)胞角蛋白 96T
PRR7: 突觸富含脯酸膜蛋白7抗體 IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。