更新時(shí)間:2023-10-20
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
產(chǎn)品名稱 | 浮萍染料法PCR鑒定試劑盒直銷 |
英文名稱 | spirodelae |
貨號(hào) | BH-P99467 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,濃度為2×。具有快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),可大限度的減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作過程中的污染,使用時(shí)只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補(bǔ)足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請(qǐng)保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性
可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如1.的特異性;2.多重反應(yīng)(高通量);3.反應(yīng)體系配置,無需冰塊;4.無懼高GC含量PCR;5.預(yù)防交叉污染;6.廣泛的設(shè)備兼容性。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A 間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,MLTC-1細(xì)胞 CHSE細(xì)胞,鮭魚胚胎細(xì)胞四氫生物蝶呤(THB)二鹽酸Tetrahydrobiopterin (THB) di質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人胚胎胰腺組織來源細(xì)胞;CCC-HPE-2鹽酸決奈達(dá)隆Dronedarone HCl質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RBP4 Others Rat 大鼠 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸決奈達(dá)隆-d6Dronedarone-d6 HCl質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)去丁基鹽酸決奈達(dá)隆-d6Desbutyl Dronedarone-d6 HCl質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CD1B Others Human 人 CD1B / CD1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) O-脫芳香基雷諾嗪O-Desaryl Ralazine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A肌醇Isitol質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
6-10B, 人鼻咽癌細(xì)胞系肌醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Isitol質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17 大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL4'-羥基4'-Hydroxy Flurbiprofen質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
甲狀腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1mlO-去甲O-Desmethyl Gefitinib質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) O-DesmorpholipropylO-Desmorpholipropyl Gefitinib質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
PK(15)豬腎上皮細(xì)胞 PK (15) of porcine kidney epithelial cells MEM+10% FBS6-羧基四甲基羅丹明琥珀酯,6-TAMRA, SE質(zhì)量規(guī)格:用于熒光標(biāo)記6-TAMRA, SE
IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His 標(biāo)簽)卵清蛋白;雞蛋白蛋白質(zhì)量規(guī)格:BR,80~90%Ovalbumin/Egg albumins
QGY-7703(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 7721(7721肝癌細(xì)胞)米替福新質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMiltefosine
CL-0212SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Miltefosine
CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 6-硫質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR6-TG/Thioguanine
浮萍染料法PCR鑒定試劑盒直銷CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)偶氮錄膦mN5克2~8℃
P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 啊錄米雙炳醋酯 clcloMqtcsonq Dipropionctq 66734-13-
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-131.2-環(huán)氧環(huán) Cyclohqxqnq oxidq 86-0-4
ADAM