更新時間:2023-10-20
青葙子探針法PCR鑒定試劑盒*公司相關(guān)產(chǎn)品AKR1C2 鎂shēng huà shì jì容量:RT10克AKR1C3 對二甲苯25克AKR1C4 硫化鎘shēng huà shì jì容量:RT10克AKR1CL1 鋅5克RT
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 青葙子探針法PCR鑒定試劑盒* |
英文名稱 | celosiae |
貨號 | BH-P99930 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) 四氫甲基嘧啶羧酸(>98%,BR)Ectoine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人視網(wǎng)膜muller細胞*培養(yǎng)基 100mL氧化鎂碳酸鈉合劑Eschka's mixture質(zhì)量規(guī)格:BC
GH3細胞,大鼠埀體瘤細胞 5637(人膀胱癌細胞) 非洲綠猴腎細胞;Vero E6乙酯(>98%,BR)Ethyl dodeconoate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 標簽)乙基曙紅(>95%,BS)Ethyl eosin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS
HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 肝竇內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)沒食子酸乙酯Ethyl gallate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲基倍他環(huán)糊精,2,6-二甲基-β-環(huán)糊精Me-β-CD質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IMR-32 人神經(jīng)母細胞瘤細胞埃博霉素B;帕土匹龍Epothilone B(EPO906, Patupilone) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CEM/C1人急性細胞白血病細胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSA 83-01;A83-01A8301質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
VEGFA Protein Mouse 重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白Amresco 進分瓊脂粉Agar質(zhì)量規(guī)格:BR,進分
小鼠垂體細胞(MPC)(5×105) 5637, 人膀胱癌細胞 Human氟伏沙明Fluvoxamine質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀
SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細胞裂解液 (陽性對照) -d8Budesonide-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進口
EJ 人膀胱癌細胞6α-羥基6α-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
SW1116人結(jié)腸腺癌細胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS6β-羥基6β-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽)亞鈣水合物Folinic acid calcium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人脂肪細胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 Human鈉鹽 Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
青葙子探針法PCR鑒定試劑盒*REG1B Others Human 人 REG1B / PSPS2 人細胞裂解液 (陽性對照) 溴百里酚藍鈉鹽25克
貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)2,4-二叔丁基本酚,99%A 2,4-Di-tqrt-butylphqnol 96-76-4
CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人細胞裂解液 (陽性對照) 粘蛋白胭脂紅5KU
人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL四本硼鉀100毫克保存:-20℃
A-431細胞,人表皮癌細胞 流感嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤
實驗流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。