更新時間:2024-01-17
H4-II-E-C3 大鼠肝癌細胞公司正在出售的產(chǎn)品:hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞) 5×106cells/瓶×2 人維生2(VD2)ELISA 試劑盒 IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgG 0.1mlG3PP: 轉(zhuǎn)運蛋白G3PP抗體 NP Others SARS SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
H4-II-E-C3 大鼠肝癌細胞 | 1×106 | P-X1130 |
1、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
2、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠肝外膽管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠配對框基因6(PAX6)ELISA試劑盒 BK(Mouse bradykinin) 小鼠血管舒緩激肽 96T
NOR1: 神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體 Hep 3B2.1-7細胞,肝癌細胞 人肝癌細胞,QGY-7703細胞 T-112B(含100mL酶解緩沖液)10mL
HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒 PI(Mouse Proinsulin) 小鼠胰島素原 96T
Netrin 4: 軸突生長誘向因子4抗體 胰島β細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP](穩(wěn)定株)小鼠軟骨細胞 ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP] (stable sain) mice cartilage cells DMEM/F12(1:1)+10% FBS 大鼠膀胱抗原(BTA)ELISA 試劑盒 MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) 人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子 96T
IFT80: 細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白80抗體 CNE1, 人鼻咽癌細胞系
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽) 犬白介素18(IL-18)ELISA 試劑盒 4-Oct 胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白(多肽) 0.5mg
CD101: CD101抗體 VEGFAA Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 VEGF165 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人皮下脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL 犬γ基(GABA)ELISA 試劑盒 OPN(osteopontin) 骨橋蛋白(抗原) 0.5mg
IGSF5: 免疫球蛋白超家族成員5抗體 MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 倉鼠beta胰島細胞,HIT-T15細胞 CRFK(貓腎細胞)
H4-II-E-C3 大鼠肝癌細胞髓核細胞培養(yǎng)基NPCM 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 Ntn1(Human Netrin-1) 人軸突生長誘向因子1 96T
RICTOR: 雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體 A172(人腦膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0909 人軟骨細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)ELISA試劑盒 SFT(Human sulfatide) 人腦苷酯 96T
RelB: 核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 CL-0245Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細胞)5×106cells/瓶×2
細胞 大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒 REG-4(Human regenerating gene IV ) 人再生基因蛋白IV 96T