更新時(shí)間:2023-10-26
F-*0 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20是采用大腸桿菌經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,-70℃保存3個(gè)月轉(zhuǎn)化效率可保持在90%以上。
F-*0 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20以下是的訂購(gòu)信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
F-*0 感受態(tài)細(xì)胞100ul*203. 加入700 μl無(wú)抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
F-*0 感受態(tài)細(xì)胞100ul*202. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽(yáng)性克隆密度過(guò)大時(shí),由于營(yíng)養(yǎng)不足,陽(yáng)性克隆生長(zhǎng)變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過(guò)高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒廠家 大鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒廠家 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒廠家 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Pentosidine ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒廠家 大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒廠家 大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒廠家 大鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒廠家 大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒F-*0 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒廠家 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Cathepsin K,cath-K ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,