更新時(shí)間:2023-10-26
pRice-Eactin基因核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品HCT-116細(xì)胞,低分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,HEC-1-A細(xì)胞 肺成纖維細(xì)胞cDNAHPF cDNA依普利酮()HPLC>98%,Eplerenone長尾綠猴腎細(xì)胞;4647*>98.5%,BREtodolacHAPLN1 Others Human HAPLN1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) *()HPLC>98%,
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:pRice-Eactin基因核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:48T 0.2PCR管
編號(hào):BH-P97076
分類:PCR-熒光探針法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2頭孢匹羅()Cefpirome Sulfate效價(jià)測(cè)定
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞阿米*Amisulpride含量≥900μg/mg,度大于99%,USP32
胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA 直腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL阿米*()Amisulpride>98%,
纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080*酸Fenofibric acid>98%,BR
ITGA5&ITGB6 Others Human ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) *酸()Fenofibric acidHPLC>98%,
HDBEC Pellet 皮膚血管內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊(少年者) > 1 mio.cells 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM-prf碳酸氫銨(AR)ARAmmonium bicarbonate
CL-0348Hce-8693(盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))5×106cells/瓶×2氯化銨(AR)>99.5%,ARAmmonium chloride
B3GALT5 Others Human B3GALT5 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 水楊酸(AR)>99.5%,ARSalicylic acid
氣管上皮細(xì)胞總RNAHTEpiC NAL-1酸>99%,ARL-Tartaric acid
盤羊皮膚細(xì)胞;OAM-S1 大鼠成肌細(xì)胞,L6細(xì)胞 TM4細(xì)胞,正常小鼠Leydig細(xì)胞二甲基脲>98%,BRN,N'-Dimethylurea
pRice-Eactin基因核酸檢測(cè)試劑盒小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-c miRNA5 μg珊瑚菜內(nèi)酯,珊瑚菜素()HPLC≥98%,phelloptorin
LMAN2L Others Human LMAN2L 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鞣花酸()HPLC≥98%,Ellagic acid
大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL右旋延胡索乙素()HPLC≥98%,D-Tetrahydropalmatine
Mo-MuLV/3T3細(xì)胞,小鼠Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞 T/G HA-VSMC(主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞) 非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2087對(duì)溴芐胺 >98%4-Bromobenzylamine
CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)2”-O-沒食子?;鸾z桃苷()HPLC≥98%,2”-O-Galloylhyperin