更新時(shí)間:2023-10-26
lNVSc1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50菌株一種常用于質(zhì)??寺〉木?。其φ80lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
lNVSc1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50以下是的訂購信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
lNVSc1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級。
2. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時(shí),由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會(huì)降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
lNVSc1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*505. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
PI Ab-IgG/IgM 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格: 48T/96T
GPC-3 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 規(guī)格: 48T/96T
PL-A2 人磷脂酶A2 規(guī)格: 48T/96T
PCK 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規(guī)格: 48T/96T
PGM 人磷酸葡萄糖變位酶 規(guī)格: 48T/96T
PI3K 人磷酸肌醇3激酶 規(guī)格: 48T/96T
PaCoA 人磷酸化乙酰 規(guī)格: 48T/96T
pERK 人磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格: 48T/96T
P-PKC 人磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格: 48T/96T
PGAM2 人磷酸甘油酸變位酶2 規(guī)格: 48T/96T
人淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit,48T/96T 人淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
Lptn/LTN/XCL1 人淋巴細(xì)胞趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
LFA-3/CD58 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 規(guī)格: 48T/96T
LFA-2/CD2 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2 規(guī)格: 48T/96T
LFA-1/CD11a+CD18 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原1 規(guī)格: 48T/96T
LTB 人淋巴毒素β 規(guī)格: 48T/96T
LTA 人淋巴毒素α 規(guī)格: 48T/96T
LAP 人亮氨酰氨基肽酶 規(guī)格: 48T/96T
SK 人鏈激酶 規(guī)格: 48T/96T
人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA Kit,48T/96T 人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
GS-ANA 人粒細(xì)胞特異性抗核抗體 規(guī)格: 48T/96T
GCP-2/CXCL6 人粒細(xì)胞趨化蛋白-2 規(guī)格: 48T/96T
GM-CSF Ab 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體 規(guī)格: 48T/96T
GM-CSF 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格: 48T/96T
G-CSF 人粒細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格: 48T/96T
KP 人利鉀尿肽 規(guī)格: 48T/96T
CG 人冷球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ORM 人類粘蛋白 規(guī)格: 48T/96T
HTLV-Ⅰ 人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒 規(guī)格: 48T/96T
RF 人類風(fēng)濕因子 規(guī)格: 48T/96T
HLA-G 人類白細(xì)胞抗原G 規(guī)格: 48T/96T
HLA-E 人類白細(xì)胞抗原E 規(guī)格: 48T/96T
lNVSc1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50 HLA-C 人類白細(xì)胞抗原C 規(guī)格: 48T/96T
HLA-B27 人類白細(xì)胞抗原B27 規(guī)格: 48T/96T
HLA-A 人類白細(xì)胞抗原A 規(guī)格: 48T/96T