更新時(shí)間:2023-11-07
雷丸探針?lè)≒CR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)公司相關(guān)產(chǎn)品 菌種芽孢培養(yǎng)基 Bacillus 658-56-0 VB6 菌落總數(shù)檢測(cè)培養(yǎng)基 1268-19-9包裝 VB12 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 磷酸吡哆醛41468-25-1 PLP 桔汁瓊脂 Orange Serum Agar
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 雷丸探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū) |
英文名稱 | Omphalia |
貨號(hào) | BH-P99513 |
特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過(guò)增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測(cè)。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說(shuō)明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購(gòu)上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過(guò)柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無(wú)菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注:陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照為已經(jīng)抽提好的核酸(無(wú)需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽(yáng)性對(duì)照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽(yáng)性對(duì)照。
HCMEC-c 人類心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HCMEC) 500,000cells 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)(標(biāo)準(zhǔn)品)Hydrocortisone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)富馬酸伊布利特Ibutilide fumarate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
SORCS1 Others Human 人 SORCS1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 富馬酸伊布利特(標(biāo)準(zhǔn)品)Ibutilide fumarate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Oregon vole 俄勒岡地鼠硫酸異帕米星Isepamicine Sulphate質(zhì)量規(guī)格:含量≥670µg/mg
豬腎細(xì)胞;PK(15)蓓薩羅丁;貝沙羅汀Bexarotene質(zhì)量規(guī)格:>99%
RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]三苯基溴化锍(>98.0%(T))Triphenylsulfonium Bromide質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
AFM Others Human 人 AFM / Afamin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-溴咪唑并[1,2-a]吡嗪6-Bromoimidazo[1,2-a]pyrazine質(zhì)量規(guī)格:>98%
小腸平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1,2-1,2-Propanediol質(zhì)量規(guī)格:AR,分析
NCI-H209細(xì)胞,人小細(xì)胞肺癌 人癌抗雌激素耐藥株,LCC9細(xì)胞 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MEpiCGSTBB(4,5,6,7-四溴-1H-苯并三唑)TBBT;NSC 231634質(zhì)量規(guī)格:>98%,蛋白激酶抑制劑
NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MDA-MB-231(癌細(xì)胞)/氨芐(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Ampicillin Trihydrate
CL-0424RK1(大鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2阿替美唑鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRAtipamezole HCl
ICOSLG Others Human 人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿替美唑鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Atipamezole HCl
人內(nèi)根殼細(xì)胞RNAHHIRSC miRNA5 μg阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Cytarabine
QBC939細(xì)胞,人膽管癌細(xì)胞 褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞,RIN-m細(xì)胞 NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Dacarbazine
雷丸探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)人羊膜上皮細(xì)胞RNAHAmEpiC miRNA5 μg雌激素酮硫酸鹽,去氫表雄酮硫酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98%Dehydroepiandrosterone-3-sulfate
SELP Others Mouse 小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 纈鹽酸鹽 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USPValganciclovir
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1肌醇質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRIsitol
CL187/CCL187細(xì)胞,人大腸癌細(xì)胞 人色素
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。