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柴胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書

更新時間:2023-11-07

簡要描述:

柴胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品大戟因子L1 Euphorbia?factor?L1 大戟因子L1 Euphorbia?factor?L1 76376-43-7 分子式:C32H40O8 分子量:552.70
山椒子烯醇 Zeylenol 山椒子烯醇 Zeylenol 78804-17-8 分子式:C21H20O7 分子量:384.40

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

柴胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書

英文名稱

bupleuri

貨號

BH-P99605

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,43,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
儲存條件:
14或-20樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤莫吉司坦Moguisteine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞莫吉司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Moguisteine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92] 人胰島β細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL糠酸莫米Mometasone furoate質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31

人永生化細(xì)胞;CNLMG-B5537LC糠酸莫米(標(biāo)準(zhǔn)品)Mometasone furoate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

GDNF Others Rat 大鼠 GDNF 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 納他霉素,匹馬霉素,,游霉素Natamycin,Pimaricin質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
斑馬魚尾鰭細(xì)胞;AB.9 人肝癌細(xì)胞,SNU-182細(xì)胞 HEp-2(喉表皮樣癌細(xì)胞)硫酸鈰四水(>99%BR)Cerium(IV) sulfate tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

人腦瘤細(xì)胞;SF126碳酸銫(>99%,BR)Cesium carbonate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,1-環(huán)丙基乙二羧酸1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%

非洲綠猴腎細(xì)胞;VEROTAPS;N-(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸TAPS質(zhì)量規(guī)格:>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級

ACVR1B Others Rat 大鼠 ACVR1B / ALK-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PI3K 抑制劑LY294002質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,進(jìn)分
IL2RA Others Human IL2Ra / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定S-Carboxymethyl-L-cysteine

脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基AdM(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Isosorbide dinitrate

CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ;氮酮質(zhì)量規(guī)格:>97%Laurocapram

大鼠胰島細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Oxymetazoline

MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS雙壁碳納米管(>50%) 小于5nm(直徑),5-15μm(長度)質(zhì)量規(guī)格:Carbon Natube Double-walled (>50%) below 5nm(diam.), 5-15µm(length)
柴胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書DDR2 Others Cymolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BariumChorideDihydrate錄化鋇二水ACS級白色晶體粉末RTsigma

貓腎細(xì)胞;F813--2-肖基本加醋 3-Mqthyl-2-nitbqnzoic ccid

LTPEP-a-2細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞,VERO C1008 (E6)細(xì)胞 CM-M042小鼠直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLGUANIDINExy7CHLORIDE鹽酸胍技術(shù)級白色至微黃色顆粒結(jié)晶粉末R

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