更新時間:2023-11-08
柯薩奇病毒B1型核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1檸檬酸銅(>98.5%,BR)>98.5%,BRCopper(II) , hydrate正常大鼠腎細(xì)胞;NRK 結(jié)腸腺癌細(xì)胞,COLO-320細(xì)胞 ST細(xì)胞,豬細(xì)胞系(ST)氫氧化銅(>96.5%,Tech Grade)>96.5%,工業(yè)級Copper(II) hydroxideCa Ski, 細(xì)胞 Human(光譜
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:柯薩奇病毒B1型核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96396
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Sulforhodamine BBS
A549/DDP細(xì)胞,耐DDP肺癌細(xì)胞 中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL細(xì)胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Sulforhodamine BBS
S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氯化羅丹明110;羅丹明110Rhodamine 110 chloride>99%
Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml羅丹明123Rhodamine 123用于熒光標(biāo)記
腎臟上皮細(xì)胞HREpiC曲美布汀堿Trimebutine base>98%,BR
FLT4 Others Human VEGFR3 / FLT4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-核糖>98%,BRL-(+)-Ribose
CL-0308TE-13(食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-核糖()>98%,L-(+)-Ribose
VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-脫氧-L-核糖>98%,BR2-Deoxy-L-ribose
小鼠胰島細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLD-葡萄糖一水>99%,BRD-Glucose, monohydrate
PC9肺癌細(xì)胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS十二烷基硫酸鈉(分子生物學(xué)級)>99%,分子生物學(xué)級SDS
柯薩奇病毒B1型核酸檢測試劑盒細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]4'-羧基苯并-15-冠5-(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)4'-Carboxybenzo-15-crown 5-Ether
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4'-羧基苯并-18-冠6-(>97.0%(GC)(T))>97.0%(GC)(T)4'-Carboxybenzo-18-crown 6-Ether
CRT 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞24-冠8-(>93.0%(GC))>93.0%(GC)24-Crown 8-Ether
MHCC-97H肝癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移) MHCC-97H human hepatoma cells (high ansfer) DMEM+10%FBS二苯并-18-冠-6-(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Dibenzo-18-crown 6-Ether
TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 標(biāo)簽)13-乙基-18,19-二去甲基-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(左雜質(zhì)D)美國進(jìn)口13-Ethyl-18,19-dinor-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(Levonorgestrel Impurity D)
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。